離心機在微生物學(xué)診斷工作上,常被用作從被檢物料中分離出被檢微生物,并得到純培養(yǎng)(即單個一種微生物的培養(yǎng)物)。所以,一般要使用離心機對樣品開展離心分離,微生物的離心機分離培養(yǎng)方式是微生物學(xué)診斷中的一種關(guān)鍵操作方法。
分離單一微生物的方式有很多,常見的有下列幾種:
1、將被檢物料接種于適合微生物培養(yǎng)基,再于固體培養(yǎng)基表層生成的菌體中,選樣欲分離菌的單個菌體,移種于另一個適合微生物培養(yǎng)基中培養(yǎng)。由于1個菌體一般由1個細菌生成繁衍所產(chǎn)生,故培養(yǎng)出的細菌是單一的類型,即純培養(yǎng)。
2、用*的培養(yǎng)環(huán)境(如厭氧、二氧化碳環(huán)境等)分離細菌。
將被檢物料接種子易患動物身體內(nèi),使病原菌在動物身體內(nèi)繁衍,隨后從動物身體內(nèi)取物料運用離心機開展離心分離出需用的成份后培養(yǎng)。運用某一些細菌對一部分理化要素有*抵抗力,用理化方式處置接種物料,殺掉其它微生物而保留需用的細菌,再分離培養(yǎng)。
通常情況下,被檢物料用前兩種方式分離培養(yǎng)即可。如披撿物料污染比較嚴重,可首先用后兩種方式處置,再用前兩種方式得到純培養(yǎng)。
在分離培養(yǎng)操作中,嚴格執(zhí)行無菌操作。全部用品、微生物培養(yǎng)基、試劑必須通過殺菌,并且不可以長期暴露于空氣中。嚴禁拿手觸碰或用口吹已殺菌的器皿內(nèi)部。
按照被檢物料中也許 存有的病原苗的特點,選取恰當?shù)奈⑸锱囵B(yǎng)基和培養(yǎng)條件:(溫度、氣體環(huán)境等)。開展不明菌的初次分離,最好是多使用幾種微生物培養(yǎng)基,如肉湯、鮮血瓊脂、麥康克瓊脂等,每一種微生物培養(yǎng)基接種數(shù)管,分別放到普通環(huán)境和厭氧環(huán)境中培養(yǎng)。通常通過24—78小時觀察結(jié)果,但還有一部分病原菌,需用培養(yǎng)較長時間才可以生成。
被檢物料通常無需處置,可以直接按種于微生物培養(yǎng)基上。當懷疑為有芽腦的病原苗時,可將被檢物料加生理鹽水磨碎,制成1:10乳劑(液體物料無須稀釋),置60-80℃水浴中20—30分鐘,以殺掉無芽胞的雜菌,隨后再接種于微生物培養(yǎng)基中。